标准号：T/LTIA 26-2024
标准名称：基于SeqFD技术的物种鉴定技术规范
团体名称：深圳市生命科技产学研资联盟
发布日期：2024年09月12日
实施日期：2024年10月01日
设计含有简并碱基的引物，构建样本基因组测序文库，利用多重聚合酶链式反应（PCR）进行文库扩增和高通量测序，分析测序数据，获得比对结果和鉴定结论。
通过使用含有简并碱基的引物，构建样本基因组测序文库，进行高通量测序。引物的核心部分由4个稳定不变的碱基构成。另外，为了增加引物的灵活性和适应性，设计中还包括了3个可变化的碱基（NWN\NYN的组合），形成了所谓的弹性序列。这种设计使得引物能够适应并结合到基因组中的多种不同序列，从而增加了测序的广度和深度。这些碱基构成的引物能够结合基因组的内含子、编码序列、启动子上游2000?pb以及非基因区域的DNA序列。
通过使用seqtk工具随机筛选测序数据和格式转换。然后使用BLAST工具将转换后的数据与NCBI的NT数据库中的序列进行快速比对，找出潜在的匹配区域，然后计算这些区域的相似性得分，返回评分最高的匹配序列。统计匹配序列归属的物种，并通过本文件的计算公式和规则，获得样本鉴定结论。
起草单位：海南大学三亚南繁研究院、深圳华大生命科学研究院、深圳华大智造科技股份有限公司、海南省种业实验室、海南大学三亚研究院、武汉华大生命科学研究、三亚海古纪生物科技有限公司、深圳市生命科技产学研资联盟
起草人：夏志强、李小强、周红梅、李启沅、吴静静、华聪、邹枚伶、魏晓锋、游丽金、王伟文、李涛、余乐俊、夏勉、黄河飞、孙建波、何沛欣、王博、王逸丛、谢伟、武庆超、骆顺、李陶莎